双特异性抗体：潜力与挑战

      全球有超过50种双特异性抗体处于临床开发阶段，这些分子在治疗最具挑战性的疾病方面表现出巨大的潜力。然而，具有两种不同单克隆抗体特异性的优势为双克隆抗体保质保量的生产带来了巨大的挑战。

双特异性抗体生产的技术障碍

      双特异性抗体生产的一些技术障碍包括重链同源二聚化和轻重链错配。双特异性抗体可通过分别形成两种mAb，将它们部分还原并重组来生产，或者作为单细胞生产也称为knob-hole策略。在所有情况下，生产都需要采用先进的分析方法。如果缺少合适的软件工具，双特异性抗体生产可能会出现延误和质量问题。

复杂的生产需要先进的分析工具

      在本技术简报中，我们分享了三家世界领先的公司如何使用Byos分析双抗生成的复杂数据。他们各自实现了高通量、自动化工作流程，可加快分析和报告速度，同时避免了结果中的不确定性，从而更好地为各自的工艺提供知识。

Janssen的双特异性抗体开发能力

      Janssen的双特异性生产方法涉及部分还原parental mAb，这可能会导致Fab臂上的轻链发生错配。其分析策略为：生成duobodies的大片段，利用LC/MS测量质量数以寻找LC交换片段。通过Byos软件，Janssen已经实现了克隆筛选的自动化，如自动化文件加载，去卷积，峰匹配和生成报告。

Byos的Intactworkflow简化了复杂的数据分析，并提供无artifacts的去卷积。

Protein Metrics的“简约”分析可以更快速地生成更出色的数据。

Janssen自动化监测克隆筛选过程中的轻链错配，这是最有效的数据分析方法。

Genentech对双特异性变异体和克隆的高通量筛选

      Genentech通过单细胞生产和体内组装，利用knob-hole技术推动双特异性抗体的开发。Genentech使用Byos软件创建了一种高通量筛选方法，可自动执行定量和对比分析，可以快速鉴别重链同源二聚化（IgG种类）以及轻重链错配。该方法可节省90%的时间，使Genentech能够鉴别更多候选物并提高团队产出。

Genentech通过Byos软件提供报告分子复杂性所需的高通量数据分析。

高通量方法使Genentech能够快速、可靠地选择最佳克隆。

Amgen的高度自动化双特异性克隆选择筛选

      Amgen研究的异源性IgG在单个细胞系中表达时，可能产生预期之外的重组format。为实现分子设计和表达/纯化优化，Amgen使用Byos对Intact Mass进行自动去卷积，峰标识，峰定量和出具报告。Amgen现在可以自动处理大量（成百上千次）LC-MS样本，并根据检测到的质量数自动评估每个样品。

Protein Metrics的“简约”去卷积产生的artifacts更少，尤其是半质量数artifacts。

当自动鉴别预期之外的format且无artifacts时，Amgen将获益于巨大的分析效率提升。

结论 

      Protein Metrics的软件使研究人员能够快速、可靠地发掘双特异性抗体的潜力。通过使用Byos自动化工作流程、强大的新算法以及直观的用户界面和报告，生物制药公司可以加速产品开发。我们还有更多的成功案例。请联系我们，讨论您的双特异性挑战。

参考文献

      AnalytiX2018:双特异性抗体中抗体链重组的高度自动化分析。www.proteinmetrics.com/resources（海报与报告）

      自选网络研讨会：双特异性抗体部分和糖基化的HT分析。www.proteinmetrics.com/resources（视频与教程）